產(chǎn)品名稱(chēng) |
大鼠乳腺上皮細胞 |
商品貨號 |
MZ-603 |
組織來(lái)源 |
SD大鼠孕鼠(孕鼠,胎齡10-14天),1只 |
規格 |
5×105cells/T25培養瓶 |
生長(cháng)特性 |
貼壁 |
細胞形態(tài) |
上皮細胞樣 |
培養基 |
M199培養基,含FBS、上皮細胞生長(cháng)添加劑、Hydrocortisone、Insulin、Transferrin、Epinephrine、Penicillin、Streptomycin等 |
細胞污染 |
HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌檢測陰性。 |
細胞描述 |
乳腺位于皮下淺筋膜的淺層與深層之間。淺筋膜伸向乳腺組織內形成條索狀的小葉間隔,一端連于胸肌筋膜,另一端連于皮膚,將乳腺腺體固定在胸部的皮下組織之中。乳房腺體由15-20個(gè)腺葉組成,每一腺葉分成若干個(gè)腺小葉,每一腺小葉又由10-100個(gè)腺泡組成,這些腺泡緊密地排列在小乳管周?chē)?,腺泡的開(kāi)口與小乳管相連。 乳腺上皮細胞來(lái)源于乳腺小葉中。它們與腺體導管和脂肪組織一起在乳腺中形成復雜的網(wǎng)絡(luò )結構。乳腺上皮細胞在人和動(dòng)物體出生、發(fā)育和妊娠中均會(huì )受荷爾蒙調控而進(jìn)行一系列的增長(cháng)、遷移和分化。激素水平失調、細胞外基質(zhì)的變化和其它的基因因素都會(huì )導致乳腺上皮細胞惡性增長(cháng),最終導致乳腺癌的發(fā)生。了解乳腺上皮細胞的特性可以幫助我們理解乳腺癌的病例機制以及為治療確定新的靶點(diǎn)。 |
細胞傳代步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 |
細胞復蘇步驟 |
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過(guò)夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過(guò)夜)。第二天換液并檢查細胞密度。 |
細胞凍存步驟 |
待細胞生長(cháng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時(shí),棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,細胞變圓脫落后,加入2ml完全培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個(gè)凍存管細胞數目大于1X106個(gè)細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |