產(chǎn)品名稱(chēng) |
人腎上腺皮質(zhì)細胞 |
商品貨號 |
MZ-4148 |
組織來(lái)源 |
人腎上腺皮質(zhì)組織中分離得到的 |
規格 |
5×105cells/T25培養瓶 |
生長(cháng)特性 |
貼壁 |
細胞污染 |
HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌檢測陰性。 |
細胞描述 |
腎上腺皮質(zhì)構成了腎上腺的邊緣部分,它對調節機體內平衡起著(zhù)重要作用,此過(guò)程通過(guò)分泌皮質(zhì)類(lèi)固醇和雄激素實(shí)現的。分泌的類(lèi)固醇來(lái)源于構成腎上腺的三個(gè)區域,這三個(gè)區域構建了腎上腺皮質(zhì)的框架。皮質(zhì)中的細胞來(lái)源于中胚層,并形成了三個(gè)同軸區域:球狀帶、束狀帶和網(wǎng)狀帶。研究表明,腎上腺皮質(zhì)區域與髓質(zhì)區域之間有著(zhù)廣泛的聯(lián)系,皮質(zhì)細胞存在于髓質(zhì)區域,而嗜鉻細胞存在于皮質(zhì)區域。這兩種細胞的緊密聯(lián)系說(shuō)明細胞間存在交換,也使得對兩種腎上腺內分泌系統之間旁分泌信號傳導的深入研究提供了可能[1]。腎上腺皮質(zhì)細胞可用于激素調節和甾類(lèi)產(chǎn)生的深入研究。 |
細胞傳代步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 |
細胞復蘇步驟 |
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過(guò)夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過(guò)夜)。第二天換液并檢查細胞密度。 |
細胞凍存步驟 |
待細胞生長(cháng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時(shí),棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,細胞變圓脫落后,加入2ml完全培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個(gè)凍存管細胞數目大于1X106個(gè)細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |