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大鼠淋巴管內皮細胞
大鼠淋巴管內皮細胞
規格:
貨期:
編號:MZ-3811
品牌:Mingzhoubio

活化細胞
凍存細胞
熒光標記細胞

規格:
T25瓶
凍存管

產(chǎn)品名稱(chēng) 大鼠淋巴管內皮細胞
商品貨號 MZ-3811
組織來(lái)源 大鼠
規格 5×105cells/T25培養瓶
生長(cháng)特性 貼壁
細胞形態(tài) 內皮細胞樣
培養基 M199培養基,含FBS、內皮細胞生長(cháng)添加劑、Heparin、Hydrocortisone、Penicillin、Streptomycin等
細胞污染 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌檢測陰性。
細胞描述 淋巴管由毛細淋巴管匯合而成。其形態(tài)結構與靜脈相似,但管徑較細,管壁較薄。淋巴管根據其位置分為淺、深二種。 它們管位于皮下,常與淺靜脈伴行,收集皮膚和皮下組織的淋巴。淋巴管在向心行程中,通常經(jīng)過(guò)一個(gè)或多個(gè)淋巴結,從而把淋巴細胞帶入淋巴液。淋巴系統對于維持人體內環(huán)境的穩定,引流組織間隙的體液,免疫功能的發(fā)揮具有重要的意義,這些功能的發(fā)揮與淋巴管內皮細胞的功能密切相關(guān)。同時(shí)在炎癥及腫瘤過(guò)程中,淋巴管生成參與了組織的修復及腫瘤的轉移。
細胞傳代步驟 如果細胞密度達80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞復蘇步驟 將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過(guò)夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過(guò)夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
細胞凍存步驟 待細胞生長(cháng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時(shí),棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,細胞變圓脫落后,加入2ml完全培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個(gè)凍存管細胞數目大于1X106個(gè)細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
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