原代細胞是來(lái)源于不同組織器官，胚胎及血液的新鮮樣本經(jīng)特殊實(shí)驗方法處理而制備的原初培養細胞，這一過(guò)程被稱(chēng)為原代細胞分離。原代細胞具有保持原有細胞的基本性質(zhì)，如果是正常細胞，仍然保留二倍體數。
細胞的分離純化和細胞培養技術(shù)是細胞生物學(xué)實(shí)驗的基礎。我們通常把第一代至第十代以?xún)鹊呐囵B細胞統稱(chēng)為原代細胞。原代細胞培養是指將組織從動(dòng)物體內取出，經(jīng)各種酶(常用胰蛋白酶)、螯合劑(常用EDTA) 或機械方法剪碎處理，分散成單細胞，在合適的培養基中培養，使細胞得以生存、生長(cháng)和繁殖的過(guò)程。
實(shí)驗流程
原代細胞分離和培養基本步驟
1、器官和組織的選擇
盡可能的去除不必要的組織和血跡。
2、原代細胞的分離
（1）應用原代細胞分離試劑盒。
3、原代細胞的培養：
（1）原代細胞特制培養基
（2）原代細胞特制添加物
4、細胞的培養和鑒定：
原代細胞鑒定試劑盒
4、原代細胞的傳代、保存
（1）傳代：依椐細胞的生長(cháng)狀態(tài)，生長(cháng)的細胞1：2或1：3進(jìn)行傳代。
（2）保存：DMSO＋培養液＋血清
按下列順序降溫：室溫→4℃（20分鐘）→冰箱冷凍室（30分鐘）→超低溫冰箱（－80℃ 過(guò)夜）→液氮。
5、原代細胞的復蘇
（1）取出細胞，迅速放入37℃溫水中快速解凍。
（2）吸出細胞懸液，并加10倍以上培養液。
（3）用培養液適當稀釋后接種培養瓶，放入37℃ CO2 培養箱靜置培養。
項目周期
根據具體細胞的性質(zhì)不同培養周期長(cháng)短略有差異，常規參考周期為2~3周左右
交付內容
1．符合要求的原代細胞系；
2．鑒定報告；
